【賈家營(yíng)幼兒園】悅享時(shí)光——一份核酸檢測(cè)報(bào)告的誕生！

小彭

進(jìn)入PCR實(shí)驗(yàn)室必須“全副武裝”<h3>一位位身著厚重防護(hù)服的檢驗(yàn)人員，正在實(shí)驗(yàn)臺(tái)前一絲不茍地進(jìn)行核酸樣本的檢測(cè)，汗水不住地從額滲出，嘴里呼出的熱氣模糊了護(hù)目鏡。</h3></br> <strong>標(biāo)本擁有了“身份證”</strong><h3>很多人以為，核酸采樣后，直接用機(jī)器檢測(cè)很快就能出結(jié)果了。其實(shí)，從采樣護(hù)士在咽部“輕捻慢攏”后，<strong>后續(xù)還包括了樣本簽收、核酸提取、核酸轉(zhuǎn)移、核酸擴(kuò)增、結(jié)果審核等步驟。</strong></h3></br>核酸檢測(cè)樣本采集后，采集人員會(huì)清點(diǎn)數(shù)目，并用密封袋包裝好，用消毒劑噴灑消毒，然后放進(jìn)樣本轉(zhuǎn)運(yùn)箱，由專人送到核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。檢測(cè)人員收到樣本后會(huì)先對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)箱消毒，并在開(kāi)啟后對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)箱內(nèi)壁和標(biāo)本采集密封袋二次消毒，之后才是拆開(kāi)密封袋取出樣本。核酸的采集管上都有條碼信息，簽收人員要理清樣本來(lái)自哪一個(gè)社區(qū)或人群，是單采還是混采。另外，還要留意樣本上的時(shí)間，便于日后需要時(shí)回溯。<h3>之后，核酸樣本就將經(jīng)歷“奇幻漂流”的第二步——要有“身份證”啦！檢驗(yàn)人員則將這一步稱為“樣本前處理”。PCR反應(yīng)是在96孔板上實(shí)現(xiàn)的，每一個(gè)孔位都有自己獨(dú)一無(wú)二的身份。</h3></br> 檢驗(yàn)人員為剛剛送到的樣本進(jìn)行編號(hào)和信息錄入工作<h3>看似只是“前處理”，但防備之心可是一點(diǎn)兒也不能松。檢驗(yàn)人員要識(shí)別空管或溢灑情況的發(fā)生。尤其在大人群10:1混采時(shí)，<strong>小小的試管被拭子擠滿，一旦陽(yáng)性樣本出現(xiàn)了溢灑，一方面可能造成其他樣本結(jié)果的污染（假陽(yáng)性）</strong>，另一方面對(duì)實(shí)驗(yàn)室的生物安全產(chǎn)生威脅——這也是PCR實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)人員同樣要穿成“大白”模樣的原因——醫(yī)用帽子、N95口罩、面屏、護(hù)目鏡、醫(yī)用防護(hù)服、隔離衣、一次性鞋套、兩層手套，這些“束縛”卻能給檢驗(yàn)人員創(chuàng)造最安全的環(huán)境。</h3></br><h3>此外，<strong>PCR實(shí)驗(yàn)室要求嚴(yán)格分區(qū)，最好是負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室</strong>?？諝饬鲃?dòng)只會(huì)從外向內(nèi)，那么實(shí)驗(yàn)室里的污染就不會(huì)擴(kuò)散到外界，可以保證實(shí)驗(yàn)室外面的安全。</h3></br><strong>與病毒“擦肩而過(guò)”或只有2毫米</strong><h3>拿到“身份證”的核酸樣本并不能直接測(cè)試，而是要先提取核酸，對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增。因此，核酸樣本“奇幻漂流”的下一站，是PCR加樣區(qū)——簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，檢驗(yàn)人員要把病毒的遺傳物質(zhì)（核糖核酸）給“揪出來(lái)”。</h3></br><h3>此時(shí)，檢驗(yàn)人員戴著雙層手套，在生物安全柜內(nèi)一管一管地?cái)Q開(kāi)螺旋蓋，手工吸取樣本，加入核酸提取板孔中，再擰上螺旋蓋將標(biāo)本放回原處。檢驗(yàn)人員與新冠病毒“擦肩而過(guò)”的距離可能只隔著兩層乳膠手套——<strong>也就是2毫米</strong>，但核酸檢測(cè)工作不允許他們害怕。</h3></br> 檢驗(yàn)人員正在進(jìn)行核酸提取環(huán)節(jié)中的加樣步驟<br data-filtered="filtered"></br><h3>獲得核酸后，檢驗(yàn)人員用移液槍將核酸轉(zhuǎn)移至事先準(zhǔn)備好反應(yīng)液的反應(yīng)管里，制成反應(yīng)體系，讓它進(jìn)入“奇幻漂流”的下一站：<strong>擴(kuò)增分析區(qū)</strong>。</h3></br><h3>不能出錯(cuò)，不能有遺漏，不能發(fā)生生物安全事故?？梢哉f(shuō)檢驗(yàn)人員全身時(shí)刻處于高度緊張的狀態(tài)。就單說(shuō)‘加樣’，<strong>檢驗(yàn)人員要用極小的槍頭將每個(gè)提取好的核酸，大概是一滴水的四分之一加入到試劑中，每一步操作都必須十二分謹(jǐn)慎</strong>。開(kāi)蓋、加樣雖然有儀器，但現(xiàn)有的儀器在速度上并不能令人滿意，遇上大樣本篩查只能靠手工操作。</h3></br><strong>讓它變多才能檢測(cè)出來(lái)</strong><h3>經(jīng)歷了復(fù)雜費(fèi)時(shí)的前期制備過(guò)程，樣本終于來(lái)到了“奇幻漂流”的關(guān)鍵一站。樣本的采樣質(zhì)量如何、核酸提取的質(zhì)量如何、結(jié)果如何都將在此處見(jiàn)分曉。</h3></br><h3>這里不得不提一下曾斬獲諾貝爾獎(jiǎng)的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），這是20世紀(jì)80年代中期發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)體外核酸擴(kuò)增技術(shù)，它可以將目標(biāo)基因片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增百萬(wàn)倍至數(shù)億倍，成為當(dāng)今生命科學(xué)研究最為重要且廣泛使用的技術(shù)手段之一。</h3></br><h3><strong>怎么理解擴(kuò)增？</strong></h3></br><h3>如果把樣本提取出來(lái)的核酸看作是一塊土地，新冠病毒是種子，如何知道土地里有沒(méi)有種子？簡(jiǎn)單的方法是，加點(diǎn)水和肥料（試劑），讓種子一個(gè)變兩個(gè)、兩個(gè)變四個(gè)、四個(gè)變八個(gè)……病毒是看不到的，而且微量樣本也不容易檢測(cè)到，所以要讓它變多，才方便檢測(cè)出來(lái)。</h3></br> 經(jīng)過(guò)復(fù)雜的前期制備工作，才能在PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)。上機(jī)后，就是歷時(shí)約1.5小時(shí)擴(kuò)增檢測(cè)，而且中間不能有停頓、不能有斷電、不能有儀器故障，核酸檢測(cè)才能完成。<br data-filtered="filtered"></br><h3>當(dāng)反應(yīng)管在機(jī)器上開(kāi)始檢驗(yàn)后，也就意味著“開(kāi)弓沒(méi)有回頭箭”——從采樣到核酸制備任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題都可能導(dǎo)致返工重測(cè)，從而使報(bào)告時(shí)間加倍。</h3></br><h3>3月15日，國(guó)家衛(wèi)健委發(fā)布《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第九版）》。其中，《方案》將解除隔離管理和出院標(biāo)準(zhǔn)修改為“連續(xù)兩次新型冠狀病毒核酸檢測(cè)N基因和ORF基因Ct值均≥35（熒光定量PCR方法，界限值為40，采樣時(shí)間至少間隔24小時(shí)）”，這也讓很多“小白”知道，這兒的“Ct”并非到醫(yī)院拍個(gè)CT，而是指擴(kuò)增的閾值。<strong>簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)， Ct值越低，說(shuō)明陽(yáng)性越強(qiáng)；Ct值越高，說(shuō)明陽(yáng)性越弱。</strong></h3></br><h3>作為初篩實(shí)驗(yàn)室，只能向疾控中心報(bào)告“疑似陽(yáng)性”，隨后根據(jù)疾控的要求轉(zhuǎn)運(yùn)原管標(biāo)本以供復(fù)核。而PCR實(shí)驗(yàn)室也會(huì)通過(guò)紫外線消毒，通常陰性樣本會(huì)儲(chǔ)存一兩天以備查驗(yàn)。</h3></br><strong>向你飛奔而來(lái)的報(bào)告背后是汗水</strong><h3>檢測(cè)人員還需要對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行分析：包括同批隨樣本檢測(cè)的陰陽(yáng)性質(zhì)控結(jié)果是否在控、基線設(shè)置、逐孔分析內(nèi)標(biāo)及樣本結(jié)果是否正常等。<strong>當(dāng)陰陽(yáng)性質(zhì)控全部符合檢測(cè)要求，排除假陰性、假陽(yáng)性可能，對(duì)異常結(jié)果樣本及時(shí)進(jìn)行復(fù)核，確保無(wú)誤后才能最終報(bào)告結(jié)果，并上傳。</strong></h3></br> 這幾天，PCR實(shí)驗(yàn)室里的檢驗(yàn)人員都在超負(fù)荷工作<br data-filtered="filtered"></br><h3>隨著核酸樣本量不斷增大，檢驗(yàn)人員一直是在超負(fù)荷運(yùn)轉(zhuǎn)。<strong>防護(hù)服是不透氣的，全身罩在里面，剛穿上就會(huì)很熱。加之機(jī)器一刻不停，熱量積聚一天后整個(gè)實(shí)驗(yàn)室會(huì)非常悶熱，即使</strong><strong>開(kāi)著空調(diào)室內(nèi)溫度也會(huì)達(dá)到28-30℃</strong>。此外，實(shí)驗(yàn)室里靜電也很強(qiáng)烈，因此也特別干燥。為及時(shí)完成工作任務(wù)，很多人都是“5+2”、“白+黑”的節(jié)奏在工作。</h3></br><h3>來(lái)源 | 青島市教育局</h3></br> <a href="https://mp.weixin.qq.com/s/Gy_JuSYJUIjqiYIxOKRaSA" >查看原文</a> 原文轉(zhuǎn)載自微信公眾號(hào),著作權(quán)歸作者所有