富縣疾病預(yù)防控制中心基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室(P2實(shí)驗(yàn)室)PCR實(shí)驗(yàn)室建成通過驗(yàn)收

北極光

圖為陜西省衛(wèi)健局衛(wèi)健委批復(fù)的備案證明掃描件 富縣疾控中心在馮超主任，王主任，季主任的努力下，經(jīng)過一個(gè)多月緊張施工，終于建成并通過審驗(yàn)，馬上就可以啟用了，它的建成和驗(yàn)收，標(biāo)志著富縣CDC有了PCR(核酸)實(shí)驗(yàn)室。為全縣人民服務(wù)?？勺孕袡z測(cè)新冠病毒核酸檢測(cè)了。在市CDC培訓(xùn)檢驗(yàn)科4人并獲得檢測(cè)合格證書。為防新冠提供了堅(jiān)強(qiáng)后盾。自2019年11月一2020年12月以來新冠病毒(SARS一CoⅤ一2)肆虐，在全世界大流行，致使全世界1億多人為確診病例。其中美國51萬3千多人死亡，至此給全世界人民敲起警鐘，對(duì)人們生命與世界經(jīng)濟(jì)無情摧毀，造成不可逆損害，使人們更加重視公共衛(wèi)生服務(wù)，和突發(fā)公共衛(wèi)生預(yù)防與應(yīng)急處置。我縣CDC也不例外，派科員省市學(xué)習(xí)，并取得培訓(xùn)合格證，并建立了p2實(shí)驗(yàn)室，即PCR實(shí)驗(yàn)室(核酸實(shí)驗(yàn)室)。它的建立和審核通過，標(biāo)志著我縣CDC可以自行檢測(cè)新冠病毒(CovID一2019)，對(duì)陽性標(biāo)本及病人發(fā)現(xiàn)起決定性作用，為防控和遏制疫情至關(guān)重要。省級(jí)，市級(jí)下發(fā)共12個(gè)盲樣考核后，市級(jí)第2次盲樣考核6個(gè)盲樣。共18個(gè)盲樣將正式進(jìn)入啟用實(shí)驗(yàn)室。為我縣新冠做出貢獻(xiàn)。PCR實(shí)驗(yàn)室布局:三區(qū)二通道;分清潔區(qū)，半污染區(qū)，污染區(qū);負(fù)壓緩沖區(qū)，緩沖壓力，緩沖污染，從而很好保護(hù)工作人員。 PCR走廊(清潔區(qū))工作人員入口 標(biāo)本庫 標(biāo)本庫一60℃冰箱 洗消間 洗消間設(shè)內(nèi)部淋浴 更衣間穿防護(hù)服 空氣過濾系統(tǒng)及負(fù)壓調(diào)控系統(tǒng)機(jī)組 機(jī)組，空氣過濾機(jī)組，負(fù)壓機(jī)組 上面三間樣本庫，消洗間，更衣間，通風(fēng)系統(tǒng)機(jī)組 清潔區(qū)，工作入員通道 一區(qū)，試劑準(zhǔn)備間(配體系) 二區(qū)樣本準(zhǔn)備間(加樣，加質(zhì)控，提取核酸病毒液) 三區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)(擴(kuò)增產(chǎn)物實(shí)時(shí)熒光分析區(qū)RT一PCR) 正在采樣 正在采，鼻咽拭子，/口咽拭子樣 一區(qū)試劑準(zhǔn)備間(配體系) BIOBASE生物安全柜(一區(qū)試劑制備區(qū))(配制試劑:將①(檢測(cè)試劑混合液)十②(酶)混勻，再將混勻試劑取20uL加至八聯(lián)管中) 內(nèi)部傳送窗 二區(qū)樣本制備間(即核酸提取間加樣本200uL，加1uL內(nèi)質(zhì)控，加入預(yù)分裝試劑盒，放入核酸提取儀提取，將提取好的病毒夜吸取50uL加入病毒凍存管;然后再吸5uL病毒液加入八聯(lián)管)其污染程度最高，需三級(jí)防護(hù)，穿防護(hù)服(防滲漏)，帶N95醫(yī)用口罩，雙層手套。帶防護(hù)鏡，或防護(hù)面屏，或帶頭套正壓呼吸機(jī)(供氧)。膠靴，鞋套。 GeneRotex96型核酸提取儀(二區(qū)標(biāo)本制備區(qū)，全自動(dòng)提取約25分鐘) 三區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物分析間(PCR)經(jīng)傳送窗口，把加好試劑(20uL)和提取好核酸(5uL)的八聯(lián)管放入擴(kuò)增儀上(總量25uL)，按步驟弄好后看結(jié)果及曲線圖來判定陽性或陰性。 圣湘雅睿AMoLarray:AM一6000型(三區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū));將八聯(lián)管(96人份)管子蓋扣緊放入PCR擴(kuò)增儀擴(kuò)增約需1小時(shí)30分鐘，在電腦查看ct值，曲線，及RdRp基因，N基因，E基因，來綜合判斷陽/陰性 BIOBASE高壓消毒鍋 標(biāo)本傳遞窗及廢棄物傳遞窗;送樣人從污染通道進(jìn)入標(biāo)本傳遞窗。 工程師在指導(dǎo)PCR擴(kuò)增儀操作用試劑為上海之江。 檢驗(yàn)人員認(rèn)真學(xué)習(xí) 工程師正在講設(shè)置 學(xué)習(xí)軟件 核酸提取儀GeneRote×96型每次做實(shí)驗(yàn)必需用掃碼槍??掃碼，設(shè)置后，才能做實(shí)驗(yàn)。每次實(shí)驗(yàn)前均需掃碼。(必需的)掃碼槍連接需在斷電情況下連接。另外要加穩(wěn)壓器。提取儀用之前和用之后均要用紫外線消毒15分鐘/30分鐘。儀器外部用紫外線照射消毒。不能用酒精消毒。用天隆科技(預(yù)分裝試劑盒;96人份，磁珠法) 丁青工程師詳細(xì)解核酸提取儀操作 丁工程師講解預(yù)分裝試劑盒如何安裝 打開放入一板(預(yù)分裝試劑盒)能做16人份;1一6例為完整的一個(gè)步聚。共可裝6個(gè)板;做96個(gè)樣。要放在洗托卡上吸取核酸提取液。2，8例(指橫列)放攪拌套，(注:攪拌套2、8例均要放滿，不能空缺)。1，7例放樣品，6和12列(分別做好的)提取核酸病毒液至八聯(lián)管，蓋好管蓋。放至擴(kuò)增儀擴(kuò)增。核酸提取儀是旋轉(zhuǎn)提取方式。紫外消毒:開關(guān)機(jī)前均要消毒。表面用清水清潔，不能用75%酒精消毒。儀器外部紫外線消毒30分鐘。 圖為打開并放入試劑反應(yīng)板 圖為試劑反應(yīng)板，要加上樣品 保險(xiǎn)絲更換應(yīng)在開關(guān)及電源線連接處中央位置。 樣本 正在穿防護(hù)服，帶護(hù)目鏡，手套雙層，鞋套 一區(qū)配體系區(qū) 一區(qū)正在配體系兩人配合 正在開生物安全柜操作 正在制備標(biāo)本 核酸全自動(dòng)提取儀正在運(yùn)行 二區(qū)樣本操作者倆人配合 正在做新冠核酸檢測(cè) 把配好體系傳過來 操作規(guī)程 正在開啟核酸儀，紫外消毒儀器內(nèi)部15分鐘 加樣，加內(nèi)部內(nèi)標(biāo)，提取核酸病毒液，加八聯(lián)管 正在吸取病毒液操作 正打開傳遞窗口 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中，細(xì)致入微，嚴(yán)謹(jǐn)審慎。 正在分裝病毒液于八聯(lián)管中 提取好的病毒液冷凍管及八聯(lián)管如圖白色八聯(lián)管，藍(lán)色架上的病毒凍存管 加完所有試劑，內(nèi)標(biāo)，陰陽對(duì)照，后檢查8聯(lián)管蓋是否扣緊呈一直線，液面是否是一直線，一排，一排檢查，防止錯(cuò)誤，及時(shí)糾正。 放入擴(kuò)增儀看是否垂直，放入是否放置平整(在同一平面，沒有高低不平。) 做完擴(kuò)增完用1moI/L鹽酸浸泡后裝入密封袋再高壓消毒，按醫(yī)療廢棄物處理。 進(jìn)行應(yīng)急演練，如人員休克，抓刺傷，潑濺，溢液，氣溶膠等。并記錄在案。 做完實(shí)驗(yàn)污染物高壓消毒，安全處理 科長及檢驗(yàn)科三位同志正在做實(shí)驗(yàn) 從穿防護(hù)服(三級(jí)防護(hù)，到一區(qū)配體系，二區(qū)制備標(biāo)本再到核酸提取，需嚴(yán)格防護(hù)，其污染程度高。)最后再到三區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。根據(jù)Ct值≤43，以及擴(kuò)增曲線s型，及RdRp基因，N基因，E基因來綜合判斷陽性或陰性。然后徹底消毒，包括防護(hù)服，護(hù)目鏡，槍頭一切物品高壓滅菌處理，三區(qū)，所有房間紫外線消毒，所有房間臺(tái)面75%酒精噴酒消毒。個(gè)人全部噴酒酒精消毒。 做完實(shí)驗(yàn)互相噴灑75%酒精消毒。房間紫外線消毒，地板含氯消毒劑托地。 做完實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格消毒實(shí)驗(yàn)室地板 正打打包實(shí)驗(yàn)廢棄物 正在消毒實(shí)驗(yàn)后廢棄物 實(shí)驗(yàn)室整個(gè)三區(qū)兩通道紫外線消毒。 此次核酸PCR實(shí)驗(yàn)室的建成為我縣新冠(2019一nCov)添加動(dòng)力，為我縣疫情助力，為我縣人民保駕護(hù)航。任重而道遠(yuǎn)，不畏艱辛，為爭取打贏新冠而努力拼搏。為全縣人民健康服務(wù)。早曰遏制新冠，還人們幸福生活。 省上新配備的衛(wèi)生應(yīng)急車一一陜J137v6 市上新配備的疫苗冷鏈車一一陜J523v6 疾病控制車一一陜JIF892這些車輛的配備為新冠疫情防控提供支持，提供后盾。富縣CDC為早日遏制疫情而不懈努力! 中心馮主任去延安領(lǐng)"五一"勞動(dòng)獎(jiǎng) 這是獎(jiǎng)給富縣疾控的五一勞動(dòng)獎(jiǎng)狀。這是對(duì)我中心自2019至2020年一年來|抗擊新冠最好的禮物。

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