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誰在折磨我的腹痛?——上篇

夏天

<h3>3月18日,周一,剛從外地講課回來的陳東科老師接到腎內(nèi)科醫(yī)生的電話,請(qǐng)求急查病人趙某的腹透液是否有真菌。經(jīng)詢問得知該病人規(guī)律透析三年,十天前懷疑感冒身體不適,自行服藥后情況并無明顯改善,六天前發(fā)現(xiàn)腹透管破裂于腎內(nèi)門診就診后更換新腹透管,一天前患者身體狀況不佳并發(fā)現(xiàn)腹透液變渾濁,遂入院治療。在14日已送檢腹透液(打入血培養(yǎng)瓶),16日已報(bào)陽,血培養(yǎng)涂片鏡下見有隔菌絲,18日平板上的絲狀真菌已經(jīng)長起來了。</h3> <h3>乳酸棉酚藍(lán)染色</h3> <h3>但是14日送檢的腹透液革蘭染色并未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌或真菌,主治醫(yī)生想通過直接鏡檢再次確認(rèn)之前陽性報(bào)警的腹透液是否為致病菌,以排除污染等。得知病人仍然有腹水可取,東科老師建議立即送份腹水來實(shí)驗(yàn)室,讓兩次腹水的鏡下結(jié)果對(duì)比,更有可信度。事不宜遲,將14日的標(biāo)本離心后取沉渣分別革蘭與熒光染色,但革蘭染色鏡下并未發(fā)現(xiàn)可疑物,而熒光染色下找到了有隔的真菌菌絲,但量不多。(<font color="#b04fbb"><b>后面有大量東科老師拍攝的鏡下美圖和操作小視頻)</b></font><br></h3> <h3>真菌熒光染色發(fā)現(xiàn)幾處真菌菌絲</h3> <h3>半個(gè)小時(shí)后新取的腹水送至微生物室,離心后取沉渣熒光染色找到較多小的有隔菌絲<br></h3> <h3>新送的腹水第一次取沉渣革蘭染色,未發(fā)現(xiàn)真菌菌絲或孢子??蔁晒馊旧芯z,于是再次取沉渣涂片革蘭染色,閱全片終于找到了一處有著明顯的菌絲的地方<br></h3> <h3>革蘭染色與熒光染色間的對(duì)比說明兩種方法存在特異性差異。革蘭染色中當(dāng)菌絲不是長得明顯的形態(tài)時(shí),可能就會(huì)把它當(dāng)成粘液絲或染液雜質(zhì)漏檢了。而真菌熒光染色法通過使用化學(xué)熒光增白劑,與真菌細(xì)胞壁的多糖成分(如纖維素、幾丁質(zhì)等)非特異性結(jié)合,在熒光顯微鏡的紫外激發(fā)光下呈現(xiàn)熒光。該方法敏感性高、特異性高,檢出率高,使用效果好,是值得廣大微生物實(shí)驗(yàn)室推廣的。</h3> <h3>陳老師及時(shí)與臨床醫(yī)生溝通,醫(yī)生特別感激因其發(fā)現(xiàn)與臨床癥狀完全符合,當(dāng)即決定對(duì)患者進(jìn)行急診手術(shù)拔管。</h3> <h3>但因手術(shù)病房繁忙,晚上十點(diǎn)半左右陳老師才收到醫(yī)生的回信,導(dǎo)流管已取出,可見管壁上有小菌落,陳老師叮囑醫(yī)生將其送檢真菌培養(yǎng)和涂片。</h3> <h3>第二天上班陳老師帶著進(jìn)修生們處理已在肉湯中培養(yǎng)了一夜的腹腔導(dǎo)流管。</h3><h3>工具:消毒的鑷子、一次性痰盒,一次性5毫升注射器、載玻片、蓋玻片,10%KOH等</h3> <h3>可見管壁內(nèi)一節(jié)一節(jié)的白色小菌落,幾乎將導(dǎo)管內(nèi)腔堵死。</h3> <h3>因內(nèi)生物緊緊地貼在導(dǎo)管內(nèi)壁,用注射器抽取管內(nèi)的肉湯沖洗管道,但很難沖下來。</h3> <h3>多次試驗(yàn)均未成功,陳老師想了下叮囑我們把剪刀在酒精燈上過火消毒后用剪刀把管道剪斷,再用一次性注射器的針頭把里面的菌落挑出來</h3> <h3>挑出來的小菌落,好大一塊</h3> <h3>東科老師操作小視頻</h3> <h3>全部取出來的導(dǎo)管內(nèi)小菌落,量還真不少</h3> <h3>分別接種在SDA和全封閉式一次性小培養(yǎng)基上,以便后續(xù)觀察。</h3> <h3><b style=""><font color="#010101">介紹一下——</font><font color="#b04fbb">全封閉一次性小培養(yǎng)基</font></b> (下篇培養(yǎng)真菌時(shí)需用上)</h3><h3><font color="#010101">全封閉式一次性真菌培養(yǎng)基,不直接與絲狀真菌接觸,大大降低了</font>生物安全危害,可直接將培養(yǎng)基放在顯微鏡下觀察(低、中、高、油鏡均可),不損傷內(nèi)部結(jié)構(gòu),觀察完后還能收起來繼續(xù)培養(yǎng),對(duì)后續(xù)生長<span style="color: rgb(1, 1, 1);">無任何影響。若</span><span style="color: rgb(1, 1, 1);">有需要還可將乳酸棉酚藍(lán)染液直接滴入小培養(yǎng)內(nèi),可直接</span><span style="color: rgb(1, 1, 1);">鏡下觀察被染上色的</span><span style="color: rgb(1, 1, 1);">菌落立體</span><span style="color: rgb(1, 1, 1);">形態(tài)。</span></h3> <h3>隨后進(jìn)行壓片鏡下觀察,取一塊小菌落在載玻片上</h3> <h3>取10%的KOH,加一滴在菌落上,消化一兩分鐘后,蓋上蓋玻片,用鑷子輕壓蓋玻片表面,使菌絲團(tuán)散開,以便鏡下觀察</h3> <h3>東科顯微鏡拍照神器用起來</h3> <h3>鏡下可見大量菌絲,多如蠶絲,觸目驚心。還可見量較多無色鐮刀樣的小孢子</h3> <h3>直接壓片后鏡下觀察小視頻</h3> <h3>另取一小菌落進(jìn)行熒光染色后,形態(tài)更加明顯</h3> <h3>鐮刀樣子的小孢子</h3> <h3>美麗的形態(tài),無情的“殺手”</h3> <h3>熒光染色鏡下小視頻</h3> <h3>每一位微生物工作者應(yīng)該都深有同感,完美地處理了一例感染性導(dǎo)管內(nèi)標(biāo)本,既找到了致病菌又為臨床為病人解決了難題,是一件多么開心的事情,這時(shí)就連平時(shí)工作時(shí)一本正經(jīng)的東科老師也調(diào)皮起來了(偷偷爆兩張照)</h3> <h3>這位可愛的老師有木有萌萌噠??</h3> <h3>晚上醫(yī)生微信咨詢時(shí),陳老師又將白天處理的圖片發(fā)過去,讓臨床醫(yī)生更直白地了解患者的致病菌</h3> <h1><b><br></b></h1><h1><b>因篇幅原因“誰在折磨我的腹痛”-上篇 暫告一段落,小小透露下后續(xù)的內(nèi)容有波折更加精彩……</b></h1><h3><b><br></b></h3><h1><b><font color="#ff8a00"><br></font></b></h1><h1><b><font color="#ff8a00">福利——東科老師拍攝的鏡下美圖</font></b></h1><h3><b><font color="#ff8a00"><br></font></b></h3><h3><b><font color="#ff8a00"><br></font></b></h3>
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